质粒转化是什么?
质粒转化是指将外源质粒导入原核细胞的过程。其中的转化是指将外源的脱氧核糖核酸分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段。
将质粒脱氧核糖核酸导入细菌的过程称为转化。此感受态细菌细胞在氯化钙低渗溶液中膨胀为球状。质粒脱氧核糖核酸与氯化钙形成抗磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经42摄氏度短时间的热冲击处理,促进细胞吸收脱氧核糖核酸复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子。
质粒的特点是什么?
(1)质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点,供外源DNA片段(基因)插入其中。
(2)携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后,在细胞中进行自我复制,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA同步复制。
(3)质粒DNA分子上有特殊的标记基因,如四环素抗性基因,氨苄青霉素抗性基因等标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。